随着生物技术的快速发展，转基因作物在全球范围内的种植和应用日益普遍。小麦作为全球主要粮食作物之一，其转基因品种的研发与推广也备受关注。然而，转基因成分的引入可能引发食品安全、生态环境以及国际贸易等一系列问题。为保障消费者知情权、满足各国法规要求并维护市场公平，对小麦及其加工产品（如面粉、面包、麸皮等）中转基因成分的精准检测显得尤为关键。
小麦及其产品的转基因成分检测主要围绕以下几类目标展开：
1. 外源基因片段检测：包括启动子（如CaMV 35S）、终止子（如NOS）、标记基因（如nptII）等转基因构建元件的筛查；
2. 特异性转化事件鉴定：针对已批准或未批准的转基因小麦品系（如MON 71800）进行特异性基因序列验证；
3. 定量分析：对含有转基因成分的产品进行含量测定，以满足阈值标签法规要求（如欧盟的0.9%阈值）；
4. 加工产品适应性检测：验证深加工过程中DNA降解对检测结果的影响。
当前主流的转基因检测技术包括以下三类：
1. PCR技术
- 定性PCR：通过特异性引物扩增目标基因片段，结合凝胶电泳或毛细管电泳进行结果判定；
- 实时荧光定量PCR（qPCR）：利用TaqMan探针或SYBR Green染料实现转基因成分的定量分析，灵敏度可达0.01%。
2. 蛋白质检测法
- ELISA法：通过抗原-抗体反应检测外源蛋白表达产物，适用于未加工原料的快速筛查；
- 侧流层析试纸条：现场快速检测技术，10分钟内可定性判断转基因成分存在。
3. 新一代测序技术（NGS）
基于全基因组测序分析，可发现未知转基因事件并实现多靶标并行检测，尤其适用于复杂加工产品的成分溯源。
全球范围内主要的检测标准体系包括：
国际标准
- ISO 21572:2019《食品中转基因生物成分检测—核酸提取与定量方法》
- ISO 24276:2006《转基因产品检测通用要求与定义》
国家标准
- 中国GB/T 19495系列标准（涵盖核酸提取、PCR检测等全流程）
- 美国AOAC官方方法（如AOAC 2004.10）
- 欧盟ENGL检测指南（规定转化事件特异性检测流程）
行业法规
- 欧盟法规(EC) No 1829/2003和1830/2003对转基因标签和检测提出明确要求
- 中国《农业转基因生物安全管理条例》规定强制检测目录与阈值标准
检测过程中需严格执行以下质控措施：
1. 设置阳性/阴性对照和空白对照
2. 采用国际认可的标准物质（如IRMM-410系列）进行方法验证
3. 对DNA提取效率进行定量评估（如紫外分光光度法）
4. 通过扩增内参基因（如小麦TAF10基因）确认检测体系有效性
结果判读需结合扩增曲线、熔解曲线及电泳条带特征进行综合分析，当Ct值≤35且扩增效率在90%-110%范围内时判定为阳性。定量检测需通过标准曲线计算转基因成分占比，并评估测量不确定度。
